文献类型：期刊文章

作　　者：李娟玲[1] 刘国民[1] 曹嵩晓[1] 罗轶奇[1]

机构地区：[1]海南大学苦丁茶研究所,海口570228

出　　处：《农学学报》

基　　金：海南大学校级重点学科专项资金研究课题"海南野生鷓鸪茶资源的种质收集与遗传多样性的RAPD分子标记"

年　　份：2011

卷　　号：1

期　　号：4

起止页码：14-21

语　　种：中文

收录情况：JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：为了建立鹧鸪茶RAPD-PCR的优化反应体系,首先通过单因素试验选定其各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验设计方法,对影响鹧鸪茶RAPD-PCR反应的5种因素进行4水平优化试验。并运用SAS软件对试验结果进行了分析,最后确定优化的RAPD-PCR反应体系为:10×Buffer缓冲液2.5μL+Mg2+2.5mmol/L+dNTPs0.2mmol/L+TaqDNA聚合酶1.5U+S28引物0.48mmol/L+80ng模板,定容至25μL。PCR扩增程序为:94℃预变性4min,然后按94℃变性30s,38℃退火45s,72℃延伸120s,进行45个循环,最后72℃延伸10min;16℃保存。该优化的RAPD-PCR反应体系具有良好的稳定性和重现性,可应用于鹧鸪茶不同居群间亲缘关系和遗传多样性分析。

关 键 词：鹧鸪茶  RAPD 影响因子  体系优化  

分 类 号：Q785]