文献类型：期刊文章

作　　者：王雨晨[1] 王君[1] 王元凯[1] 严亚贤[1]

机构地区：[1]上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室,上海200240

出　　处：《上海交通大学学报（农业科学版）》

基　　金：国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2007AA10Z424)

年　　份：2011

卷　　号：29

期　　号：2

起止页码：69-74

语　　种：中文

收录情况：CAB、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：采用戊二醛法将半抗原伏马毒素B1分别与载体蛋白钥孔血蓝蛋白（KLH）和蛋白卵清白蛋白（OVA）偶联成为完全抗原KLH-FB1和OVA-FB1。OVA-FB1作为包被抗原建立ELISA方法;KLH-FB1作为免疫原免疫8周龄Balb/c小鼠,应用杂交瘤细胞融合技术制备单克隆抗体。经三次亚克隆后,筛选出两株（6H3,6H11）能特异、稳定分泌抗FB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。选择其中一株杂交瘤细胞通过体内诱生腹水的方法制备单克隆抗体,经检测表明单克隆抗体的亚型为IgG1,轻链为κ型。采用间接ELISA测得腹水纯化后效价达l∶16 000,抗体对伏马毒素的半数阻断浓度（IC50）为8.26 ng/mL,对玉米赤霉烯酮、黄曲霉素B1等结构类似物几乎不存在交叉反应,与其他结构的氯丙嗪、链霉素等无交叉反应。利用获得的抗FB1单克隆抗体,建立了间接竞争ELISA检测方法,检测灵敏度为0.44 ng/mL,检测线性范围为0.93~73.06 ng/mL,加标回收率在线性范围内达到回收率可达78.4%~102%。

关 键 词：伏马毒素B1  半抗原 单克隆抗体 间接竞争ELISA

分 类 号：R379]