文献类型：期刊文章

作　　者：孙妍[1,2] 张亦陈[1] 刘逸尘[1] 王雪惠[2] 王宇凡[1] 耿绪云[2] 孙金生[1,2] 杨卫军[3]

机构地区：[1]天津师范大学生命科学学院,天津300387 [2]天津市水产养殖病害防治中心,天津300221 [3]浙江大学生命科学学院,杭州310058

出　　处：《水生生物学报》

基　　金：国家自然科学基金(30571421;30871907);天津市应用基础及前沿技术研究项目(10JCZDJC18200;09JCYBJC15000;10JCYBJC09200);国家科技支撑计划项目(2006BAD09A11);天津市高等学校科技发展基金计划项目(20080618);天津师范大学博士基金项目(52LX18119)资助

年　　份：2011

卷　　号：35

期　　号：2

起止页码：210-217

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、PROQUEST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：根据实验室分离自中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的一种蜕皮抑制激素(Molting-inhibiting hormone,MIH)N端氨基酸测序结果设计简并引物,采用RACE方法,首次从中华绒螯蟹眼柄中克隆到蜕皮抑制激素基因全长cDNA(Es-MIH,GenBank登录号:DQ341280),该基因全长为1457 bp,开放阅读框为330 bp,编码110个氨基酸(含有35个氨基酸的信号肽);其成熟肽包含C7-C44、C24-C40和C27-C53三个二硫键,有典型的CHH家族结构域。该cDNA编码的氨基酸序列与地蟹(Gecarcinus lateralis)MIH同源性最高,达到了85%。Northern杂交和半定量RT-PCR显示蜕皮间期成体蟹仅在眼柄中有MIH基因表达,提示该基因的表达具有一定组织特异性。利用pCR T7/NT TOPO TA系统重组表达MIH成熟肽,纯化的重组蛋白得率为0.3 g/L,纯化产物经质谱鉴定为中华绒螯蟹MIH。研究解决了CHH家族神经肽在机体中的表达量少,直接纯化较难的问题,为深入研究MIH的作用机制和在生产上控制中华绒螯蟹蜕皮和生长奠定了基础。

关 键 词：中华绒螯蟹 蜕皮抑制激素基因  组织表达  重组表达  纯化

分 类 号：Q781] Q786