文献类型：期刊文章

作　　者：张洪斌[1] 吴定涛[1] 黄丽君[1] 胡雪芹[1] 王旭[1]

机构地区：[1]合肥工业大学化工学院制药工程系,合肥230009

出　　处：《微生物学报》

基　　金：安徽省长三角科技联合攻关项目(10140702001);合肥工业大学大学生创新性实验计划项目(CXSY10067)~~

年　　份：2011

卷　　号：51

期　　号：4

起止页码：495-503

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：【目的】从土壤中筛选到一株新的产右旋糖酐酶的真菌F1001,为酶法制备药用级右旋糖酐提供新的右旋糖酐酶产生菌株。【方法】通过形态特征和ITS rDNA序列分析方法鉴定菌株。利用硫酸铵盐析、Sepharose 6B凝胶柱纯化,得到纯度较高的酶蛋白。以右旋糖酐70 kDa为底物,对右旋糖酐酶酶学性质及催化机理进行研究。【结果】经过鉴定确定菌株F1001为棘孢青霉(Penicillium aculeatum)。通过SDS-PAGE测得棘孢青霉右旋糖酐酶的分子量为66 kDa左右。酶促反应的最适温度为35℃,最适pH为5.0,酶在pH 4.0-7.0和50℃以下稳定。酶的最适底物浓度为3%,酶催化水解右旋糖酐的主产物为异麦芽糖,确定该酶为内切右旋糖酐酶,并且只对连续的α-1,6葡萄糖苷键起作用。酶的Km值为3.55×10-5 mol/L,Vmax=4.29×10-2 mol(葡萄糖)/min.L。Cu2+和Zn2+对酶活有较强的促进作用,低浓度的Cu2+使酶活力提高到134.7%,Mn2+对酶催化活力抑制作用较强。【结论】筛选得到一株新的右旋糖酐酶的产生菌F1001,产生的右旋糖酐酶活性高、稳定性较好。为该酶进行催化反应和工业应用提供了重要参数。

关 键 词：右旋糖酐酶  棘孢青霉  分离纯化 酶学性质

分 类 号：TQ925]