文献类型：期刊文章

作　　者：曹嵩晓[1] 李娟玲[1] 刘国民[1] 王艺[1] 戴景[1]

机构地区：[1]海南大学苦丁茶研究所,海南海口570228

出　　处：《热带生物学报》

年　　份：2011

卷　　号：2

期　　号：1

起止页码：35-41

语　　种：中文

收录情况：ZGKJHX、普通刊

摘　　要：为了建立广霍香优化的ISSR-PCR反应体系,首先通过单因子试验选定其各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验设计的方法,对影响广藿香ISSR-PCR反应的5种因素4水平进行优化试验。结果表明:广藿香ISSR-PCR的优化反应体系最终确定为:在25μL反应体系中,含DNA模板40 ng,Mg2+浓度为2.5 mmol.L-1,引物浓度为0.3μmol.L-1,TaqDNA聚合酶用量为1.5 U,dNTPs浓度为150μmol.L-1。PCR扩增程序为:94℃预变性5 min,然后按94℃变性45 s,52.7℃退火45 s,72℃延伸90 s,进行40个循环,最后72℃延伸7 min,4℃保存。

关 键 词：广藿香 ISSR-PCR 单因子试验 正交设计

分 类 号：S567.21]