文献类型：期刊文章

作　　者：张玉星[1] 马艳芝[1,2] 赵国芳[1,3]

机构地区：[1]河北农业大学园艺学院河北省梨工程技术研究中心,河北保定071001 [2]唐山师范学院生命科学系,河北唐山063000 [3]北京金泰恒业有限责任公司富地分公司,北京100031

出　　处：《中国农学通报》

基　　金：河北省自然科学基金(303240)

年　　份：2011

卷　　号：27

期　　号：6

起止页码：50-53

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CSCD、CSCD_E2011_2012、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以雪花梨为材料,对ISSR反应体系中的模板用量、引物浓度、dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶用量等一些重要参数进行探索和优化,初步建立了稳定的具有广泛适用性的梨属植物ISSR技术的反应体系及扩增程序,即20μL体系中含1×buffer(内含1.5mmol/LMgCl2)、模板DNA40～60ng、引物浓度为0.2μmol/L、dNTP200μmol/L、Taq DNA聚合酶1U。扩增程序为:94℃5min、退火60s、72℃延伸120s,然后连续39个循环为94℃60s、退火温度(52℃左右)60s、72℃延伸120s,完成最后1个循环后,在72℃继续延伸10min,然后在4℃保温,最后通过1.4%的琼脂糖凝胶电泳检测其扩增产物。

关 键 词：梨  ISSR 反应体系  扩增程序  

分 类 号：S661.2]