文献类型：期刊文章

作　　者：赵法茂[1] 齐霞[2] 张天英[3] 李天骄[4] 毕建杰[4] 王宪泽[4]

机构地区：[1]泰山学院生物系,山东泰安271021 [2]泰安市科学技术协会,山东泰安271000 [3]山东省荣成市农业局,山东荣成264300 [4]山东农业大学作物生物学国家重点实验室,山东泰安271018

出　　处：《中国农业科学》

基　　金：山东省自然科学基金(ZR2010CM034);山东省高等学校科技计划(J10LC63);泰山学院引进人才项目(Y2008-2-6);国家"十一五"科技支撑计划项目(2006BAD04B01)

年　　份：2011

卷　　号：44

期　　号：6

起止页码：1077-1084

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、FSTA、GEOBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：【目的】阐明小麦淀粉去分支酶(Debranching enzyme,DBE)的结构和酶学特性,为品质改良提供理论依据。【方法】以小麦品种糯麦2号为材料,利用硫酸铵分级沉淀、超滤、阴离子交换柱层析和葡聚糖凝胶层析法对异淀粉酶(Isoamylase,ISA)同工酶聚合体进行分离纯化,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对ISA聚合体的结构和组成成分进行分析。【结果】小麦籽粒胚乳中异淀粉酶(ISA)形成2种不同聚合体,即ISA1同源四聚体和由4个ISA1与1个ISA2组成的异源五聚体,分子量分别约为320 kD和380 kD。ISA1同源四聚体的最适催化温度为30℃,40℃处理10 min后完全失去活性;ISA1/ISA2异源五聚体的最适温度为35℃,50℃处理10 min后仍有50%的活性。纯化后的ISA1和ISA2进行Native-PAGE检测证明,ISA2单独存在没有催化活性,将ISA2加入到ISA1中可检测到与ISA1/ISA2异源聚合体相同的ISA活性。【结论】小麦胚乳中存在2种形式的ISA多亚基聚合体;在40℃和50℃高温条件下,ISA1/ISA2异源聚合体的热稳定性高于ISA1同源聚合体;ISA2可显著增强ISA1聚合体的酶活性,可能在支链淀粉合成中起关键作用。

关 键 词：小麦 淀粉去分支酶  异淀粉酶聚合体  热稳定性

分 类 号：S512.1]