期刊文章详细信息
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生实验室,上海200241 [2]青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109
基 金:国家自然科学基金青年基金(30700593);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目
年 份:2011
卷 号:38
期 号:3
起止页码:108-112
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:用纯化的重组蛋白His-gCN813制备抗PRV-gC抗体,并分析伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)gC蛋白在真核细胞的表达情况。本研究以提取的病毒基因组为模板,PCR克隆PRV gC全长基因,构建gC真核表达质粒p3xFLAG-gC,在真核细胞中表达gC基因;纯化蛋白His-gCN813制备的抗体,Western blotting和间接免疫荧光(IFA)检测到p3xFLAG-gC转染真核细胞和PRV感染细胞中的gC蛋白。结果表明本试验成功构建了PRVgC基因真核表达系统,获得了特异性抗PRV gC抗体,重组gC真核表达质粒p3xFLAG-gC转染Vero细胞,表达的重组蛋白gC为72 ku,PRV感染Vero细胞,表达的gC蛋白为55、72和94 ku,主要定位在细胞浆,gC蛋白可以作为PRV感染的指示分子,为下一步研究PRV和宿主相互作用及PRV的复制奠定了基础。
关 键 词:伪狂犬病病毒 抗PRVgC抗体 Westernblotting
分 类 号:Q78]
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