文献类型：期刊文章

作　　者：李大伟[1] 黄灿平[1] 张彦明[1] 谢建华[2] 冉智光[2] 熊仲良[2] 范伟兴[1]

机构地区：[1]中国动物卫生与流行病学中心,青岛266032 [2]重庆市动物疫病预防控制中心,重庆401147

出　　处：《畜牧兽医学报》

基　　金：科技部863专项基金项目(2007AA02Z405)

年　　份：2011

卷　　号：42

期　　号：2

起止页码：306-310

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、DOAJ、EMBASE、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：本研究旨在建立一种可一次性区分牛支原体、丝状支原体丝状亚种小克隆和无乳支原体的三重PCR诊断方法,为临床诊断和流行病学调查提供可靠检测技术。根据GenBank发表的上述3种病原的基因组序列保守区域设计3对特异性引物建立三重PCR方法;确定其检测敏感性,以猪支原体、鸡支原体、无乳支原体和丝状支原体丝状亚种小克隆基因作模板检验其特异性;同时和病原分离鉴定结果对比其准确性。结果表明在优化体系和条件下能够同时得到扩增长度为448、549、375 bp 3条特异性片段,未扩增出猪、鸡支原体模板特异性片段;其敏感性(可检测到的最小模板DNA含量)为0.8 ng.μL-1;36份临床样品检测结果显示,三重PCR检测结果与分离培养鉴定方法一致,均能鉴定出牛支原体阳性病料。本研究建立的三重PCR诊断方法能够一次性鉴别3种支原体,具有高敏感性、特异性和准确性,可用于临床诊断和流行病学调查。

关 键 词：牛支原体 丝状支原体丝状亚种小克隆  无乳支原体  三重PCR

分 类 号：S852.62]