文献类型：期刊文章

作　　者：李黄金[1] 陈伟[1] 赵林[1] 唐伟[1]

机构地区：[1]广东药学院生命科学与生物制药学院生物技术系,广州510006

出　　处：《现代预防医学》

基　　金：广东省科技攻关计划资助项目(2007A020300007-8);广东药学院科研启动基金(2006SMK06)

年　　份：2011

卷　　号：38

期　　号：6

起止页码：1080-1082

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、IC、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：[目的]建立抗氯霉素单链抗体(scFvCAP)的大肠杆菌高效生产体系。[方法]采用重叠延伸PCR法组装scFvCAP,并通过优化5'端序列实现高效表达,采用β-环糊精人工伴侣系统实现SDS变性蛋白的复性。[结果]成功组装scFvCAP基因(Genebank ID:GU258048)。在强启动子T7驱动下,scFvCAP基因独立表达时未见显著表达,而通过同义突变所得突变基因scFvCAP mut(Genebank ID:GU258048)即可高效表达。高效表达所形成的包涵体蛋白可溶于1%SDS-8mol/L尿素溶液,经β-环糊精人工伴侣系统复性后所获scFvCAP具有与母本单克隆抗体相似的亲和力。[结论]成功建立了基于大肠杆菌基因工程系统的scFvCAP高效生产体系。

关 键 词：氯霉素 单链抗体 高效表达  复性

分 类 号：R978.1]