文献类型：期刊文章

作　　者：欧立军[1,2,3] 颜旺[3] 廖亚西[3] 梁云浩[3] 佘朝文[1,2,3]

机构地区：[1]民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室,湖南怀化418008 [2]湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室,湖南怀化418008 [3]怀化学院生命科学系,湖南怀化418008

出　　处：《中草药》

基　　金：湖南省高校创新平台开放基金项目(09K106);湖南省科技计划重点项目(2009FJ2008)

年　　份：2011

卷　　号：42

期　　号：2

起止页码：353-357

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、IPA、JST、RCCSE、RSC、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的建立并优化天门冬ISSR-PCR反应体系和扩增程序,为探讨天门冬种质间遗传多样性提供依据。方法采用单因子试验和正交设计法,研究Mg2+、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA、延伸时间及循环次数对PCR扩增的影响。结果天门冬ISSR-PCR的最佳反应体系为25μL的反应体系中含模板DNA 40 ng、Mg2+1.25 mmol/L、dNTP 320μmol/L、引物1.2μmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U。在此基础上,从50条引物中筛选出13条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物,并通过梯度PCR试验,确定引物最佳退火温度。结论建立的天门冬ISSR-PCR反应体系,经过17份天门冬种质检验,证明该体系稳定可靠,可用于天门冬遗传分析。

关 键 词：天门冬  ISSR-PCR 正交设计 单因子试验 遗传分析  

分 类 号：R286.1[中药学类]