文献类型：期刊文章

作　　者：张巍[1,2] 陈品林[1] 雷明[1] 成鹰[1] 陈欢[1] 曹献英[1] 杜丽[1] 张冬琳[1] 刘涛[1] 许世英[3] 符运南[3] 祁超[2] 王凤阳[1]

机构地区：[1]海南大学农学院,海口市动物基因工程重点实验室,海口570228 [2]华中师范大学生命科学学院,武汉430079 [3]海南大田国家级自然保护区,东方572600

出　　处：《兽类学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30560021)

年　　份：2011

卷　　号：31

期　　号：1

起止页码：97-102

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、GEOBASE、IC、JST、PUBMED、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：应用RT-PCR方法对海南坡鹿细胞分裂周期蛋白42(Cell division cycle 42,CDC42)编码区进行扩增,将扩增产物与PET-42a载体连接,重组质粒鉴定正确后,进行生物信息学分析;构建pET42a-hdCDC42表达载体,经IPTG诱导表达,将表达产物进行SDS-PAGE、可溶性分析、纯化及Western blot分析。结果表明,海南坡鹿CDC42含有1个576 bp的开放阅读框,编码191个氨基酸。经IPTG诱导表达后,得到一个带有His-tag和GST的约54 kD的融合蛋白,用抗His单克隆抗体进行Western blot,得到一条约54 kD的特异性抗体结合带,表明海南坡鹿CDC42原核表达载体成功构建并表达。

关 键 词：海南坡鹿 CDC42 克隆 原核表达 纯化  

分 类 号：Q786]