文献类型：期刊文章

作　　者：吴永青[1] 葛坚[1] 邱鹏新[1] 李艳艳[1] 林明楷[1] 郭彦[1]

机构地区：[1]中山医科大学中山眼科中心眼科医院

出　　处：《中华眼科杂志》

基　　金：国家自然科学基金;广东省科委重点攻关项目基金;广东省中医药管理局基金

年　　份：1999

卷　　号：35

期　　号：3

起止页码：190-193

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX1996、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、PUBMED、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的建立体外视网膜神经节细胞（ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｓ，ＲＧＣｓ）培养和纯化模型。方法出生后１～３天ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ（ＳＤ）乳鼠，ＲＧＣｓ在ｂａｓａｌｍｅｄｉｕｍｅａｇｌｅ（ＢＭＥ）培养基中培养，相差显微镜下观察细胞生长规律。羊抗鼠单克隆抗体ＦＩＴＣＴｈｙ１．１鉴定ＲＧＣｓ，并通过Ｔｈｙ１．１单抗进行ＲＧＣｓ的分离纯化。四唑盐（ｍｏｎｏｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ，ＭＴＴ）微量比色法检测细胞活性。结果较高的细胞接种密度或加入顶盖提取液（ｔｅｃｔａｌｅｘｔｒａｃｔ，Ｔｅ）均有利于混合培养的ＲＧＣｓ生长存活。ＭＴＴ检测法显示加Ｔｅ培养的实验组其吸光度（Ａ）值较对照组增加了３倍；在ＲＧＣｓ培养２天时，按细胞接种密度为１×１０３个／ｍｍ２的培养组较５００个／ｍｍ２的培养组，有突起的细胞数多３倍以上。ＲＧＣｓ经Ｔｈｙ１．１单抗纯化，其纯化率约达９５％。在无神经营养因子的条件下，纯化培养的ＲＧＣｓ于４８ｈ后很少存活。而混合培养的ＲＧＣｓ存活时间可持续２或３周。结论在一定条件下的ＲＧＣｓ能够于体外培养存活，其生长存活能力依赖于靶组织及其它视网膜细胞的营养作用。采用Ｔｈｙ１．１单克隆抗体纯化的方法可?

关 键 词：视网膜 神经节细胞 RGCS 细胞培养  青光眼  

分 类 号：R775] R329－33[临床医学类]