文献类型：期刊文章

作　　者：黄时海[1] 李湘萍[2] 康超[1] 黄飞[3] 汪晟[1] 吴孔阳[1] 曹喜秀[1] 曹普美[1] 何鑫平[1] 梁智群[1]

机构地区：[1]广西大学生命科学与技术学院,广西南宁530005 [2]广西大学动物繁殖研究所,广西南宁530005 [3]南宁新技术创业者中心,广西南宁530007

出　　处：《酿酒科技》

基　　金：广西区教委人才项目(桂教人200962);国家大学生创新基金(合同编号091059318);广西大学实验教改项目(092301)

年　　份：2011

期　　号：1

起止页码：24-27

语　　种：中文

收录情况：ZGKJHX、普通刊

摘　　要：在毕赤酵母中表达康氏木霉(Trichoderma koningii)纤维素酶基因cbhI。提取经诱导的康氏木霉mRNA,通过反转录及PCR反应扩增纤维素酶cbhI基因cDNA。将cbhI基因克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA上,采用电激法将经SacⅠ线性化的重组质粒pPICZαA-cbhI转化毕赤酵母GS115,MD及G418抗性平板筛选cbhI基因高拷贝转化子,并用PCR鉴定转化子。BMMY培养基中加入0.5%甲醇对毕赤酵母进行纤维素酶CBHI诱导表达。SDS-PAGE电泳结果显示,表达的重组蛋白相对分子质量约67 kD,pNPC酶活为24.1 U/L,酶蛋白量为0.22 mg/mL,表明,康氏木霉cbhI可以在毕赤酵母中表达,并具有较高活性。

关 键 词：微生物 康氏木霉 毕赤酵母 cbhI基因  表达  

分 类 号：Q78]