文献类型：期刊文章

作　　者：曲宪成[1] 尚晓莉[1] 程翠[1] 曲学伟[2] 张勇[1] 张开岳[1] 蒋骄云[1]

机构地区：[1]上海海洋大学水产与生命学院,上海201306 [2]烟台市牟平区渔业技术服务中心,山东烟台264100

出　　处：《中国水产科学》

基　　金：上海市重点学科建设项目(S30701)

年　　份：2011

卷　　号：18

期　　号：1

起止页码：23-28

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：应用抑制性差减杂交技术构建了黄鳝（Monopterus albus）IV期卵巢和间期性腺的差减cDNA文库。正向差减杂交以间期性腺为试验方,IV期卵巢为驱动方;反向差减杂交以IV期卵巢为试验方,间期性腺为驱动方。将获得的差减cDNA片段连接质粒载体,然后转化大肠杆菌DH5α,最后获得的正、反向差减文库分别含461、678个重组子。经PCR扩增鉴定插入片段范围为200-2 000 bp。随机选取正、反文库共100个阳性克隆测序分析,得到90个有效基因片段,与GenBank进行BLASTx和BLASTn同源比对。进一步从文库中选取2个基因用于半定量RT-PCR,对文库质量进行验证。结果表明,所建文库能够达到富集这两期性腺差异表达基因的目的。黄鳝性腺差减文库的构建,为进一步分离、鉴定黄鳝性腺发育和性逆转的相关基因奠定了基础。

关 键 词：黄鳝 性腺 抑制性差减杂交 差减CDNA文库

分 类 号：S917[水产类]