文献类型：期刊文章

作　　者：汪家旭[1] 黄建炜[1] 叶曦[2] 李国伟[2] 牛建军[1]

机构地区：[1]厦门市疾病预防控制中心,厦门361021 [2]厦门市海沧区疾病预防控制中心,厦门361026

出　　处：《中国人兽共患病学报》

基　　金：福建省医学创新基金(2009-CXB-67);厦门市科技基金(3502Z20094021);福建省科技项目(2008N2005)联合资助

年　　份：2010

卷　　号：26

期　　号：12

起止页码：1110-1113

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的建立荧光定量PCR检测美洲钩虫的方法。方法提取虫体基因组DNA、根据GenBank中美洲钩虫ITS-2序列设计特异引物,PCR扩增ITS-2序列、克隆、测序和比对。常规PCR检验引物特异性。将ITS-2序列扩增产物回收、纯化后经T克隆转入大肠埃希菌DH5α,提取重组质粒,鉴定后作为标准品模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做灵敏性和重复性试验。结果构建的荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线的吸收峰单一,实验重复性良好。结论成功构建了SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测美洲钩虫的方法,可用于快速、准确、定量检测美洲钩虫。

关 键 词：美洲钩虫 rDNAITS-2序列  荧光定量PCR SYBR Green  Ⅰ  

分 类 号：R383.1]