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期刊文章详细信息

小鼠IL-35基因的克隆及原核表达    

Clone and Prokaryotic Expression of Mouse IL-35 Gene

  

文献类型:期刊文章

作  者:唐媛媛[1] 鞠吉雨[1] 朱平[1] 王丽娜[1] 林志娟[1] 邸大琳[1] 苗乃法[1]

机构地区:[1]潍坊医学院免疫学教研室,山东省高校免疫学重点实验室,山东潍坊261053

出  处:《潍坊医学院学报》

基  金:潍坊医学院研究生创新基金(YC2008014)

年  份:2010

卷  号:32

期  号:5

起止页码:324-327

语  种:中文

收录情况:普通刊

摘  要:目的克隆小鼠mlL-35两亚基mEBI3,mlL-12p35cDNA,并构建mlL-35基因的原核表达载体并进行诱导表达。方法RT—PCR方法从RAW246.7细胞中扩增mEBI3基因及脂多糖体外刺激BALB/c小鼠的脾细胞中扩增mlL-12p35基因,通过重叠PCR方法扩增出mEBI3-Linker-mlL-12p35基因,并构建原核表达载体pET-30a.mlL-35,转化感受态E.coliBL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法检测目的蛋白的表达。结果成功克隆了mEBI3、mlL-12p35cDNA,通过重叠PCR方法扩增出mEBI3-Linker—mlL-12p35片段,并构建出原核表达载体pET-30a-mlL-35;在IPTG诱导下在E.coliBL21(DE3)中高效表达相对分子质量(Mr)为50000的重组mlL-35蛋白,目的蛋白主要以包涵体的形式存在于沉淀中。结论利用构建的原核表达载体pET-30a-mlL-35成功表达出mlL-35蛋白,为进一步探讨mlL-35的生物学功能奠定了基础:

关 键 词:mIL-35  载体构建  原核表达

分 类 号:R392.11]

参考文献:

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耦合文献:

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引证文献:

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同被引文献:

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