文献类型：期刊文章

作　　者：李朋波[1,2] 薛龙飞[1] 王彦霞[1] 张曦[1] 李召虎[1] 华金平[1]

机构地区：[1]中国农业大学农学与生物技术学院/作物遗传改良北京市重点实验室/作物基因组学与遗传改良农业部重点开放实验室/杂种优势研究与利用教育部重点实验室,北京100193 [2]山西省农业科学院棉花研究所,运城044000

出　　处：《棉花学报》

基　　金：教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-06-0106);教育部长江学者和创新团队发展计划;国家863计划项目(2006AA10A108;2007AA10Z125);高等学校学科创新引智计划(111-2-03)

年　　份：2011

卷　　号：23

期　　号：1

起止页码：10-14

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：采用高盐、低pH值法提取雷蒙德氏棉叶绿体DNA;通过物理剪切法获得随机断裂的DNA片段;剪切片段末端、补平修饰后与pCC1FOS载体连接;用噬菌体包装蛋白包装重组DNA,侵染大肠杆菌EPI300,构建了雷蒙德氏棉叶绿体基因组文库。对于叶绿体DNA剪切,以1 mL注射器中等速度吸打18次为最佳参数。叶绿体基因组Fosmid文库滴度为1×104 cfu.mL-1,插入片段大小平均为38 kb,最终筛选出39个克隆用于后续研究,覆盖叶绿体基因组9.2倍。以叶绿体特异标记筛选出能够覆盖雷蒙德氏棉叶绿体全基因组的6个克隆:F66,F46,F28,F8,F55和F3,为基因组结构和功能基因分析提供了良好的基础。

关 键 词：雷蒙德氏棉  叶绿体DNA FOSMID文库

分 类 号：S562]