文献类型：期刊文章

作　　者：马丽娟[1] 冯瑜[1] 江丽萍[1] 申敏[1] 柴友荣[1]

机构地区：[1]西南大学农学与生物科技学院,农业部生物技术与作物品质改良重点实验室,重庆市作物品质改良重点实验室,重庆市油菜工程技术研究中心,重庆400716

出　　处：《农业生物技术学报》

基　　金：国家自然科学基金(30771237);国家高技术研究发展计划(863)(No2006AA10Z110、No2008AA10Z152和No2006AA10A113);国家重点基础研究发展规划(973)项目(No2006CB101604);重庆市科技攻关项目(NoCSTC2009AB1030)共同资助

年　　份：2010

卷　　号：18

期　　号：6

起止页码：1189-1196

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：pFGC5941是使用较多的植物RNA干扰载体,但其间隔区过长,间隔区与启动子间可用酶切位点偏少。本研究采用基于甘蓝型油菜(Brassica napus)PAP2基因第2内含子(BnPAP2I2)的新型间隔区取代了pFGC5941的原有PhChsA间隔区,并在新间隔区与启动子之间的多克隆位点处新增了一个AatⅡ切点,改进后的载体取名为pFGC5941M。克隆了芸薹属透明种皮1(TT1)基因家族RNA干扰片段BTT1Ⅰ,将其反义片段和正义片段采用NcoⅠ+AatⅡ和BamHⅠ+XbaⅠ分别插入到pFGC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成重组载体pFGC5941M-BTT1Ⅰ(简称pBTT1Ⅰ),复合PCR鉴定表明载体构建成功,转化根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404后获得工程菌株。pBTT1Ⅰ的构建有助于揭示芸薹属种皮发育和种皮色素积累的机理和探索黄籽性状分子育种。

关 键 词：芸薹属 甘蓝型油菜 透明种皮1(TT1)  RNAI 载体  

分 类 号：S511]