文献类型：期刊文章

作　　者：冉智光[1,2,3] 童光志[1,2,3] 孔令达[1,2,3] 仇华吉[1,2,3] 张绍杰[1,2,3] 李亚香[1,2,3] 王玉春[1,2,3] 陈焕春[1,2,3]

机构地区：[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 [2]重庆市畜牧兽医科学研究所 [3]华中农业大学畜牧兽医学院

出　　处：《中国兽医杂志》

年　　份：1999

卷　　号：25

期　　号：5

起止页码：3-5

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX1996、CAB、CAS、RCCSE、核心刊

摘　　要：本研究根据伪狂犬病病毒（ＰｒＶ）共有ｇＢ和疫苗株缺失的ｇＥ基因序列分别设计并合成１对通用（ＰＢ１／ＰＢ２）和１对鉴别引物（ＰＥ１／ＰＥ２），以在我国广泛使用的疫苗株Ｂａｒｔｈａ－Ｋ６１及从国内外收集的野毒株Ｓ、ＳＵ、Ｆ、Ｌ、Ｙ、Ｍｉｎ－Ａ、Ｓｈｏｐｅ、Ｓ（川）、ＳＬ１、１０＃、ＥＡ（鄂Ａ）ＤＮＡ为模板在同一反应管中同时扩增ｇＢ和ｇＥ基因序列建立了复合多聚酶链反应（ＰＣＲ）方法。ＰＣＲ产物经２．０％琼脂糖凝胶电泳显示，从所有１１株野毒ＤＮＡ中都扩增出３７２ｂｐ和５２６ｂｐ两个片段，而Ｂａｒｔｈａ－ｋ６１只扩增出３７２ｐｂ一个片段。酶切分析证明ＰＣＲ产物是特异性的。ｇＢ基因是ＰｒＶ主要保护性抗原基因，是病毒复制必需的，强弱毒都有此基因；Ｂａｒｔｈａ－Ｋ６１株是ｇＥ基因缺失的弱毒。所以，本实验建立的方法通过１次ＰＣＲ即可有效鉴别疫苗毒与野毒。这一方法将在今后根除伪狂犬病计划中发挥重要作用。

关 键 词：伪狂犬病病毒 PCR 鉴别诊断  野毒株 弱毒疫苗

分 类 号：S852.655]