文献类型：期刊文章

作　　者：梁超[1] 李传军[2] 邓黎莉[1] 周国华[1,2]

机构地区：[1]中国药科大学生命科学与技术学院生物制药教研室,南京210009 [2]华东医学生物技术研究所

出　　处：《中华生物医学工程杂志》

基　　金：南京市科技发展指令性计划项目（200801087）

年　　份：2010

卷　　号：16

期　　号：4

起止页码：304-308

语　　种：中文

收录情况：CAS、INSPEC、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的根据免疫磁珠法的原理设计研制自动化粪便脱落细胞提取仪，实现大肠癌脱落细胞的自动化富集。方法根据粪便组分、理化特性以及粪便脱落细胞分布特点，设计制造包括粪便样本采集装置、粪便样本预处理器、脱落细胞-免疫磁珠结合装置和脱落细胞-免疫磁珠复合物洗涤装置的自动化粪便脱落细胞提取仪。采用抗大肠癌特异表面抗原表皮细胞黏附分子（EpCAM）的单抗Ber-EP4包被至磁珠表面制备免疫磁珠，用于从细胞培养物中富集大肠癌细胞，并在显微镜下观察免疫磁珠与大肠癌细胞的结合效果。收集10例大肠癌患者的癌组织（或癌旁组织），并应用自动化粪便脱落细胞仪提取患者粪便样本的脱落细胞，应用实时荧光定量PCR检测癌组织（或癌旁组织）以及粪便样本的脱落细胞肿瘤相关基因c-myc、cox-2和CD44v6的表达，并对比两种不同来源的样本检出的3种基因的阳性表达率。结果设计制作了自动化粪便脱落细胞提取仪样机，并且结合自行制备包被特异抗体的免疫磁珠成功提取到直肠癌细胞，细胞回收率达27％。在10例癌组织或癌旁组织中，c-myc、cox-2、CD44v6基因的阳性表达率分别为20％、10％、20％，而在粪便脱落细胞中均为100％，差异有统计学意义（均P〈0．01）。自动粪便脱落细胞仪提取的患者粪便样本的脱落细胞为肿瘤细胞。结论利用免疫磁珠富集大肠癌脱落细胞是可行的，以此为依据制作的自动化脱落细胞提取仪可以用于临床大肠癌的早期筛查。

关 键 词：结直肠肿瘤 粪便 脱落细胞 免疫磁珠法 自动化装置

分 类 号：R318.6[生物医学工程类]