文献类型：期刊文章

作　　者：邵红霞[1] 章黎[1] 杨彬[1] 冯萌[1] 付永峰[1] Hiroshi Tachibana[2] 程训佳[1]

机构地区：[1]复旦大学上海医学院病原生物学系,上海200032 [2]Department of Infectious Diseases,Tokai University School of Medicine,Isehara

出　　处：《中国免疫学杂志》

基　　金：国家自然科学基金项目(No.30371331);上海市基础研究重点项目(No.08JC1401000)

年　　份：2010

卷　　号：26

期　　号：11

起止页码：1007-1010

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:构建天然人源IgGFab噬菌体抗体库并分析来源于健康人外周血B淋巴细胞的抗体基因可变区的多样性及优势选择。方法:以DNA重组技术从300名健康志愿者的外周血淋巴细胞中扩增出全套人抗体轻链及重链Fd基因,分别插入噬菌体载体pFabICN相应位置,构建天然人源免疫球蛋白G基因文库;进一步从抗体库中随机挑选克隆,获得重轻链基因进行核苷酸序列测定并利用IgBLAST数据库分析抗体基因可变区的同源家族。结果:从4×108库容的天然人源IgGFab噬菌体抗体库中随机挑选克隆,对其中32个轻链及重链Fd基因插入正确的克隆进行核苷酸序列测定和氨基酸序列的推算,获得29条彼此完全不同的Fd重链基因及轻链基因。以IgBLAST数据库比对分析显示29条重链基因的V区分别属于VH3(72.4%),VH1(10.3%),VH4(6.9%),VH5(6.9%)和VH7(3.4%)基因家族。29条轻链基因分别属于Vκ1(44.8%),Vκ2(15.4%),Vκ3(11.5%),Vκ4(23.1%)基因家族和Vλ1(11.5%)基因家族。结论:以300份健康人外周血淋巴细胞的抗体基因构建的天然人源IgGFab噬菌体抗体库基因多样性良好,重链VH3基因家族存在优势表达。

关 键 词：噬菌体展示库  免疫球蛋白Fab片段  免疫球蛋白重链基因 抗体多样性  

分 类 号：R392.1]