文献类型：期刊文章

作　　者：易海涛[1] 刘志刚[1] 闫浩[1] 刘芳[1] 赵郭存[1] 夏立新[1]

机构地区：[1]深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所,广东深圳518060

出　　处：《江西师范大学学报（自然科学版）》

基　　金：国家自然科学基金(30871752);深圳出入境检验检疫局科技计划项目(SZ2008105);深圳市深港创新圈和深圳大学创新团队基金资助项目

年　　份：2010

卷　　号：34

期　　号：5

起止页码：531-535

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、IC、JST、MR、PROQUEST、RCCSE、ZGKJHX、ZMATH、核心刊

摘　　要：通过提取花生总RNA,设计特异性引物,RT-PCR克隆花生Ara h2.02基因,将反转录的基因连入pMD19-T Simple Vector,提质粒酶切鉴定并测序,将测序正确的片段连入原核表达载体pET-32a(+)上,并转入BL21(DE3)宿主表达菌中,IPTG诱导表达、Western-blotting检测该重组蛋白的免疫原性.测序结果表明:克隆的花生Ara h2.02基因片段全长为519 bp,编码为172个氨基酸,与GenBank中蛋白序列100%相同.诱导表达后的蛋白经SDS-PAGE鉴定,目的蛋白大小与理论值相符.Western-blotting结果表明该蛋白能与花生过敏病人混合血清中的IgE结合,具有免疫原性.成功克隆并表达了花生过敏原Ara h2.02,该基因表达的重组蛋白具有良好的免疫原性.

关 键 词：花生 过敏原  Arah2.02  克隆 表达  免疫印迹

分 类 号：Q785]