文献类型：期刊文章

作　　者：张彪[1] 郭凌川[1] 董亮[1] 周赟[1] 吴淳[1] 胡欣[1] 潘展腾[1] 钟良君[1] 王守立[1]

机构地区：[1]苏州大学医学部病理学系,江苏苏州215123

出　　处：《苏州大学学报（医学版）》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81072186);苏州大学大学生创新性实验计划基金资助项目(5731512810);苏州大学大学生课外学术科研基金资助项目(KY2010343B)

年　　份：2010

卷　　号：30

期　　号：5

起止页码：975-977

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、IC、核心刊

摘　　要：目的构建转化生长因子(TGF)-β1短发卡RNA(shRNA)表达载体,为肿瘤生物学研究奠定方法基础。方法根据TGF-β1的mRNA序列,运用Ambion公司的Target Finder软件筛选TGF-β1shRNA的候选点,在BglⅡ和HindⅢ位点克隆到表达载体pSUPER gfp-neo上。重组的shRNA pSUPER gfp-neo在大肠杆菌DH5a上筛选和鉴定。分别用酶联免疫吸附法(ELISA)测定和免疫荧光筛选最佳TGF-β1shRNA靶点序列。结果 ELISA和免疫荧光染色结果显示,shRNA-a、shRNA-b和shRNA-c均在不同程度上降低了靶细胞TGF-β1蛋白质表达,以shRNA-b所引起的下降最为显著(P<0.05)。结论构建的TGF-β1shRNA在肿瘤细胞中产生较好的TGF-β1沉默效果,为肿瘤生物学研究提供了一种方法。

关 键 词：RNA干扰 转化生长因子-Β1 表达载体  构建  

分 类 号：R730.3]