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人表皮蛋白质组双向电泳的建立及技术的改进
Establishment and Technical Improvement of Two-Dimensional Electrophoresis of Human Epidermis Proteome
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]重庆医科大学附属第一医院皮肤科,重庆400016 [2]重庆医科大学中医药学院中药方剂教研室,重庆400016
基 金:中华医学会-欧莱雅中国人健康皮肤研究项目(S2008050627)
年 份:2010
卷 号:23
期 号:10
起止页码:1129-1131
语 种:中文
收录情况:AJ、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、普通刊
摘 要:目的建立人表皮蛋白质组双向电泳(Two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱,并改进技术条件,为人表皮蛋白质组学的研究提供技术参考。方法以2种不同的方法提取人表皮总蛋白,使用固相pH梯度胶条进行2-DE,并对样品上样量、等电聚焦(Isoelectric focusing,IEF)参数及硝酸银染色等关键步骤进行改进,采用PDQuest8.0软件分析比较2-DE图谱。结果采用液氮研磨后再裂解的方法制备的人表皮总蛋白,以250μg上样,以改进的IEF参数和硝酸银染色步骤获得的2-DE图谱清晰、分辨率高、重复性好,匹配率为85.5%。分离出蛋白质点551±31个,均匀分布在相对分子质量14000~100000、pH5~8之间,比常规方法所获得的2-DE图谱蛋白点明显增多(P<0.05)。结论已建立了人表皮蛋白质组2-DE图谱,改进的方法比常规方法更适用于人表皮蛋白质组学的研究。
关 键 词:表皮 双向电泳 蛋白质组学
分 类 号:Q51] R392-33]
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