文献类型：期刊文章

作　　者：刘婷婷[1,2] 张杨[1] 吕善运[3] 岳寿伟[1]

机构地区：[1]山东大学齐鲁医院康复科,济南250012 [2]山东中医药大学第二附属医院 [3]美国阿拉巴马州立大学伯明翰分校

出　　处：《中国康复医学杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助课题(30872732);国家自然科学基金资助课题(81071597);山东省自然科学基金资助课题(Z2007C04)

年　　份：2010

卷　　号：25

期　　号：10

起止页码：923-927

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:以不同浓度以及序列的小干扰RNA(SiRNA)转染,培养大鼠的背根神经节(DRG),观察对神经元形态、活性变化以及瞬时感受器电位离子4(TRPV4)通道功能的影响,筛选转染这种神经元的SiRNA。方法:取新生大鼠腰背段全部DRG,将处理好的DRG神经元进行培养,将神经元随机分为正常对照组、SiRNA不同浓度组、错配组,进行SiRNA转染,然后培养相应时间后观察各组神经元在荧光显微镜的形态学特点,并用四甲基偶氮唑兰比色法(MTT)分析各组神经元细胞生长活性的改变。另外利用Fluo3荧光探针,观察SiRNA作用下细胞内游离钙对低渗溶液的反应,采用酶联免疫法方法观察KCl刺激下各组细胞释放P物质的改变。结果:荧光显微镜下观察适宜浓度组SiRNA转染DRG神经元形态较正常组无明显差异。MTT法比较10-40nM各组神经元活性的差异无显著性意义。而SiRNA作用下细胞内游离钙对低渗溶液的反应以及细胞释放P物质的改变有显著差异。结论:40-80nMSiRNA可以有效转染DRG细胞,未对DRG神经元活性产生显著影响,这为研究TRPV4通道功能提供了一个有效的方法。

关 键 词：背根神经节 瞬时感受器电位离子通道4  RNA干扰

分 类 号：R346[基础医学类]