文献类型：期刊文章

作　　者：仝利剑[1,2,3] 赵建增[1,2] 张社民[3] 高荣[1] 高英杰[1] 慕泽鑫[1,2,3] 邢海云[1] 罗胜军[4] 温涛[1,2]

机构地区：[1]吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062 [2]北京必威安泰生物科技有限公司,北京100176 [3]山西省芮城县家畜家禽疫病防治站,山西芮城044600 [4]广东省农业科学院兽医研究所,广东广州510640

出　　处：《中国兽医学报》

基　　金：山西省科技攻关计划基金资助项目(20080311036-2)

年　　份：2010

卷　　号：30

期　　号：10

起止页码：1273-1276

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：根据PRRSV VR-2332株序列设计了1对扩增PRRSV N蛋白基因的特异性引物,从PRRSV北方株感染细胞中提取总RNA,通过RT-PCR获得长约372 bp的N蛋白编码基因片段。将其克隆到pGEX-6p-1质粒,构建了原核表达载体pPRRS-N。重组基因在大肠杆菌中表达出相对分子质量约为41 000的融合蛋白,目的蛋白表达量约占菌体蛋白的28.5%。利用此重组融合N蛋白建立了一种检测PRRSV特异性抗体的双抗原夹心ELISA,并通过与商品化试剂盒的应用比较对本方法进行了系统评价。分析了来自北京、山东、河南、河北4省区13个养猪场的260份血清,结果表明,本方法的敏感性和特异性分别为93.5%和86.7%,与IDEXX PRRSV抗体检测试剂盒检测结果的符合率达到91.5%。

关 键 词：PRRSV N蛋白 双抗原夹心ELISA  

分 类 号：S852.65]