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具有丙酮酸脱氢酶功能的家蚕Bm-l(1)基因的克隆及序列结构与表达研究
Molecular Cloning,Sequence Structure and Expression Analysis of Bm-l (1) Gene with Pyruvate Dehydrogenase Function in the Silkworm,Bombyx mori
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]苏州大学医学部应用生物学系,江苏苏州215123 [2]现代丝绸国家工程实验室,江苏苏州215123 [3]邯郸学院生物科学系,河北邯郸056005
基 金:国家重点基础研究发展计划"973"项目(No.2005CB12-1005)
年 份:2010
卷 号:36
期 号:5
起止页码:759-765
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:丙酮酸脱氢酶(PDH)是丙酮酸脱氢酶复合体(PDC)中的前件酶,参与生成柠檬酸循环(TCA)的起始物乙酰辅酶A,决定生物体内营养成分的分配。利用电子克隆、RT-PCR和cDNA末端快速扩增(RACE)等方法克隆了与果蝇lethal(1)G0334基因类似的具有丙酮酸脱氢酶功能的家蚕Bm-l(1)基因。Bm-l(1)基因的cDNA全长为1 630 bp,由1 200 bp的完整ORF序列、186 bp的5'-UTR和207 bp的3'-UTR组成,含8个外显子和7个内含子,编码蛋白为399个氨基酸残基,分子质量43.93kD,pI 8.07。Bm-l(1)基因编码蛋白的69-365氨基酸残基为E1-dh结构域,该结构域为硫胺素焦磷酸依赖性脱氢酶所特有。蛋白质二级结构预测结果表明α螺旋占28.8%,β折叠占12.0%。采用Clustal W进行多序列比对发现,Bm-l(1)基因编码蛋白与赤拟谷盗等昆虫的PDH具有63%以上的序列相似性,且保守区域高度一致。Bm-l(1)基因mRNA在家蚕整个卵期、幼虫期、蛹期和刚羽化的成虫中,以及5龄3 d幼虫的头部、丝腺、生殖腺、脂肪体、中肠和血液6种组织中都有较高的转录水平,且存在较小的组织差异性。
关 键 词:家蚕 Bm-l(1)基因 丙酮酸脱氢酶 基因克隆 序列分析 基因表达
分 类 号:S881.2] Q78]
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