文献类型：期刊文章

作　　者：裴世春[1] 何娜[2] 张立军[3] 陆梅生[4]

机构地区：[1]齐齐哈尔大学食品与生物工程学院,齐齐哈尔161006 [2]黑龙江八一农垦大学食品学院,大庆163319 [3]大庆麦伯康生物技术有限公司,大庆163316 [4]上海麦柏星生物科技有限公司,上海201203

出　　处：《微生物学报》

基　　金：黑龙江省教育厅项目(1151hz025);国家自然科学基金(30771799)~~

年　　份：2010

卷　　号：50

期　　号：10

起止页码：1406-1411

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：【目的】确立基于高通量酶联免疫(HTS-ELISA)筛选方法制备高亲和力抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的方法体系。【方法】采用AFM1-BSA(Aflatoxin M1-bovine serum albumin)免疫Balb/C小鼠,利用HTS-ELISA方法筛选分泌抗黄曲霉毒素M1单抗的杂交瘤细胞株,并分析抗体的特性。【结果】筛选到14株具有分泌高活性抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化的最佳抗体的亲和力为5.5×10-10 mol/L。与黄曲霉毒素M1及其结构类似物黄曲霉毒素M2、B1、B2、G1、G2以及其他物质脱氧雪腐镰刀菌烯醇和BSA的交叉反应率分别为100%、4.5%、21.5%、1.0%、16.6%、1.0%、0%、0%。间接竞争ELISA检测最低检测限可达0.01μg/L,线性范围为0.1-10μg/L,竞争性抑制抗体反应50%的抑制浓度IC50为0.82μg/L,添加0.25-5μg/L黄曲霉毒素的牛奶间接竞争ELISA检测回收率在60.3%-152.8%之间。【结论】HTS-ELISA方法可以制备具有高亲和力的抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体,可为黄曲霉毒素M1免疫检测体系的建立提供优质抗体材料。

关 键 词：黄曲霉毒素M1 高通量酶联免疫法  单克隆抗体

分 类 号：R446.61]