期刊文章详细信息
一种来源于Bispora betulina的酸性木聚糖酶基因克隆及其酶学性质研究
Gene Cloning,Expression and Characterization of an Acidic Xylanase from Bispora betulina
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]兰州大学生命科学学院生物化学与分子生物学研究所,兰州730000 [2]中国农业科学院饲料研究所,农业部饲料生物技术重点开放实验室,北京100081
基 金:国家转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX003-002);国家肉鸡产业技术体系项目(nycytx-42-G2-05)资助
年 份:2010
卷 号:12
期 号:5
起止页码:109-115
语 种:中文
收录情况:CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊
摘 要:利用简并PCR和TAIL-PCR技术从嗜酸性真菌Bispora betulina中克隆得到一个酸性木聚糖酶基因xyn11BB。该基因全长1 207 bp,含有三段内含子、一段外显子和一个终止密码子,编码由297个氨基酸组成的蛋白质,推测蛋白质含有一个CBM1结构域。将不带原基因信号肽编码序列的cDNA基因以正确阅读框架克隆到表达载体pPIC9上,并在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中诱导表达,其表达活性达121.15 U/mL。重组蛋白经硫酸铵分级沉淀和阴离子交换柱纯化后达到电泳纯。对其酶学性质分析表明,重组木聚糖酶最适温度为50℃,最适pH为4.5,在酸性条件下具有良好的活性和稳定性,可作为饲料用酶的备选。
关 键 词:Bispora betulina 酸性木聚糖酶 毕赤酵母 酶活与稳定性
分 类 号:Q78]
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