文献类型：期刊文章

作　　者：陈明[1] 孙红宇[2] 文荣朝[1] 余政梁[1] 吴巧琪[1] 夏许可[1] 张兴梅[1] 高天明[1]

机构地区：[1]南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广州510515 [2]南方医科大学基础医学院生理学教研室

出　　处：《数理医药学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(30500608;30973481);广东省自然科学基金(9151051501000053)

年　　份：2010

卷　　号：23

期　　号：5

起止页码：516-518

语　　种：中文

收录情况：普通刊

摘　　要：目的:构建稳定表达表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的U87MG细胞株。方法:采用电转染方法将pcD-NA4/TO-EGFRvⅢ质粒导入U87MG细胞,加入zeocin筛选,进一步将细胞有限稀释并克隆化培养以建立稳定的转染细胞株。应用RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定稳定表达EGFRvⅢ基因的细胞株。结果:经RT-PCR鉴定发现V6号和V24号单克隆细胞株EGFRvⅢ基因mRNA水平高表达,进一步Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定发现V6号细胞株EGFRvⅢ蛋白水平高表达。结论:成功建立了稳定表达EGFRvⅢ的U87MG细胞株,为进一步的抗肿瘤治疗及其机制研究提供基础。

关 键 词：EGFRvⅢ  U87MG细胞  基因表达

分 类 号：R739.41]