期刊文章详细信息
牛γ-干扰素ELISA检测方法的建立与初步应用
DEVELOPMENT AND PRELIMINARY APPLICATION OF BOVINE INTERFERON-GAMMA CAPTURE ELISA
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室,扬州225009
基 金:"973"项目(2006CB504404);国家科技重大专项(2008ZX10003-010);国家公益性行业科研专项(200903027)
年 份:2010
卷 号:18
期 号:4
起止页码:54-59
语 种:中文
收录情况:CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊
摘 要:以纯化的rHis-BoIFN-γ制备兔多抗血清,辛酸—硫酸铵两步法对体内诱生的抗rBoIFN-γ单抗腹水进行纯化,用美洲商陆素(Pokeweed mitogen,PWM)刺激奶牛全血产生的分泌性天然BoIFN-γ筛选出与之反应最佳的单抗5E11。将单抗5E11以40μg/mL浓度包被,与1∶3 000倍稀释的兔抗rHis-BoIFN-γ多抗血清(13.8μg/mL)配对,以1∶6 000稀释的商品化酶标羊抗兔IgG为指示抗体,建立了BoIFN-γ抗原捕获ELISA检测方法,该方法可以检出2.56 U/100μL(30.5 pg/100μL)的rHis-BoIFN-γ、8U/100μL的rBac-BoIFN-γ和1U/100μL的分泌性天然BoIFN-γ。以商品化试剂盒作为平行对照,将获得的奶牛临床检测血浆样品使用BoIFN-γ抗原捕获ELISA法进行检测,结果显示两种方法检测符合率达到83.9%。本研究建立的BoIFN-γ抗原捕获ELISA检测方法可有效检测分泌性IFN-γ,为进一步开发BoIFN-γELISA检测试剂盒奠定了基础。
关 键 词:牛 Γ-干扰素 抗原捕获ELISA 单克隆抗体
分 类 号:R392.11]
参考文献:
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引证文献:
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