文献类型：期刊文章

作　　者：李中林[1] 钱国伟[2] 徐为[2] 李望[2] 张宝福[2] 刘俊杰[2] 陈菲菲[2] 田卉[2] 章龙珍[2] 郑骏年[2]

机构地区：[1]徐州医学院附属医院神经外科,江苏221002 [2]徐州医学院肿瘤生物治疗实验室

出　　处：《中华实验外科杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目（30972976）

年　　份：2010

卷　　号：27

期　　号：9

起止页码：1296-1298

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 观察Ki-67核心启动子调控元件对转录调控的影响.方法 根据Ki-67启动子结构软件分析结果,对Ki-67核心启动子（-223～＋30）内的5个调控区域,包括（＋13～＋30）及4个潜在Sp1结合位点（-198～-172）、（-170～-144）、（-63～-37）和（-14～＋12）进行内部缺失,目的片段缺失的Ki-67核心启动子插入pGL3-Basic载体,构建报告基因重组体质粒.将重组体分别转染肿瘤Hela、SW1990、SGC-7901、A549细胞株,使用双荧光素酶报告基因检测系统测定其转录活性,并与Ki-67核心启动子质粒pGLBK2＋转录活性比较.结果 缺失（＋13～＋30）的启动子重组体质粒在4种肿瘤细胞的转录功能均有显著提高,分别达到缺失前的1.2、2.0、1.7、1.4倍.缺失潜在Sp1结合位点的4个启动子重组体在4种肿瘤细胞的转录功能均有显著降低,其中缺失（-170～-144）后转录活性最小,在4种肿瘤细胞中分别降至未缺失前的16.2%、10.4%、6.7%、12.2%.结论 Ki-67启动子（＋13～＋30）区包含负性调控元件,对其缺失后形成的新的Ki-67核心启动子（-223～＋12）是更好的调控肿瘤基因治疗的启动子.（-198～-172）、（-170～-144）、（-63～-37）和（-14～＋12）可能存在潜在的Sp1顺式作用元件,其中-170～-144区域的顺式作用元件最为重要.

关 键 词：KI-67基因 启动子 转录调控

分 类 号：Q78]