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亚洲带绦虫EIFs3克隆与免疫反应性分析
Cloning and immunoreactivity of full-length cDNA sequence of Taenia saginata asiatica eukaryotic translation initiation factor 3 subunit
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]贵阳医学院多媒体形态学实验室,贵州贵阳550004 [2]贵阳医学院人体寄生虫教研室,贵州贵阳550004
基 金:国家自然科学基金资助(30760227);贵州省科技攻关项目(2008-3060);贵州省科技攻关项目(2009-3101);贵州省农业科技攻关项目[黔科合NY字(2009-3074)];贵州省省长基金[黔省专合字(2009)82号];贵阳市科技局社发攻关项目(2009-3005)
年 份:2010
卷 号:26
期 号:9
起止页码:1146-1148
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的对亚洲带绦虫真核翻译起始因子3(eukaryotic translation initiation factor3 subunit,EIFs 3)进行克隆及免疫学初步研究。方法利用在线生物信息学工具从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出含有EIFs3基因,并将该基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹(Western blotting)进行免疫学分析。结果 PCR,双酶切及DNA测序均显示重组体构建成功,用亲和层析法得到高纯度的蛋白,且该重组蛋白可被亚洲带绦虫及牛带绦虫及猪带病人血清识别,表明其具有免疫反应性。结论亚洲带绦虫成虫EIFs 33基因可在原核表达系统中获得具有免疫活性的高效表达。
关 键 词:亚洲带绦虫 真核翻译起始因子3 原核构建 免疫反应性
分 类 号:R383.32]
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