文献类型：期刊文章

作　　者：刘玲[1] 张景萍[1] 李卉[2] 姜孝芳[2] 陈艳[1] 李秀梅[3] 谌宏鸣[4] 赵学信[1] 李惠武[2]

机构地区：[1]新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,新疆乌鲁木齐830011 [2]新疆医科大学基础医学院科研中心,新疆乌鲁木齐830011 [3]新疆医科大学基础医学院形态中心,新疆乌鲁木齐830011 [4]新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室,新疆乌鲁木齐830011

出　　处：《新疆医科大学学报》

基　　金：新疆维吾尔自治区高技术研究与发展计划项目(200810103)

年　　份：2010

卷　　号：33

期　　号：7

起止页码：735-738

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的构建cdc42基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体,研究cdc42基因启动子区的甲基化状态对该基因表达及功能的影响。方法采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出cdc42基因,以阳性组织基因组DNA扩增出cdc42基因启动子区CpG岛,cdc42基因经双酶切后与真核表达载体pEGFP-N1相连,并转入甲基化酶缺陷的大肠杆菌E.coliER1793中扩增。经测序成功后,将重组质粒及cdc42基因启动子区CpG岛用HindⅢ酶切,连接后再次转入E.coliER1793中扩增。将重组质粒转染至食管癌细胞株Eca-109中,荧光显微镜观察结果。结果 DNA测序证明获得了包含ORF全长的cdc42基因及其启动子区CpG岛,并将双序列成功克隆入真核表达载体pEGFP-N1中。转染后荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白。结论成功构建真核表达载体,为进一步探讨cdc42基因启动子区CpG岛甲基化状态对该基因在哈萨克族食管癌细胞株中的表达及功能的影响奠定了基础。

关 键 词：CDC42 哈萨克族食管癌 载体构建  

分 类 号：R562.25]