文献类型：期刊文章

作　　者：王希辉[1] 岳寿松[3] 胡敬东[1] 黄亦钧[3] 陈金龙[1] 王婷婷[1] 范忠玲[1] 赵宏坤[1,2]

机构地区：[1]山东农业大学动物科技学院,泰安271018 [2]青岛农业大学食品科学与工程学院,山东省肉类食品质量控制工程技术研究中心,青岛266109 [3]山东农业科学院高新技术研究中心,济南250000

出　　处：《微生物学报》

基　　金：国家“十一五”食品安全关键技术重大项目(2006BAK02A21);国家肉鸡产业技术体系建设项目;山东省科技支撑计划项目“肉鸡福利型养殖模式的建立与应用”(2007GG20009001)~~

年　　份：2010

卷　　号：50

期　　号：9

起止页码：1258-1263

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：【目的】通过目的基因克隆,表达获得高产量具有生物活性的鸡白介素18成熟蛋白（maturechickeninterleukin-18,mChIL-18）。【方法】根据毕赤酵母密码子偏嗜性,通过引物设计来定点突变鸡白介素18基因,构建了重组质粒pPIC9K-mChIL-18。将线性化的重组阳性质粒电转到毕赤酵母GS115中,经筛选多拷贝阳性子后进行诱导表达。用MTT法和微量细胞病变抑制法检测其生物活性。【结果】筛选的多拷贝重组菌在诱导温度为28℃,培养液pH值为6.5,甲醇的诱导浓度为2%,诱导时间为120h时表达量最高,约为480mg/L。表达的mChIL-18蛋白能够刺激SPF鸡淋巴细胞大量增殖,用400μg/L的mChIL-18诱导淋巴细胞产生γ-干扰素（IFN-γ）,其生物活性最高可达1.7×104U/mL,且能有效抑制水泡性口炎病毒（VSV）在鸡胚成纤维细胞（CEF）上的生长。【结论】毕赤酵母能够高效表达具有生物活性的鸡白介素18,有望作为免疫佐剂运用到工业化生产和兽医临床中。

关 键 词：鸡白介素18  毕赤酵母 突变体 生物活性

分 类 号：S852.4]