文献类型：期刊文章

作　　者：龙虎[1,2] 姚伦广[2] 王姗姗[1] 陈士新[3] 谭佩婵[1] 孙京臣[1]

机构地区：[1]华南农业大学动物科学学院,广东广州510642 [2]南阳师范学院伏牛山昆虫生物学重点实验室,河南南阳473061 [3]海军广州基地赤沙干休所,广东广州510230

出　　处：《南方医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金(30700750);广东省自然科学基金(7006695);华南农业大学校长基金(2008X002)

年　　份：2010

卷　　号：30

期　　号：7

起止页码：1491-1495

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建能同时表达轮状病毒vp2、vp6、vp7基因的重组家蚕杆状病毒,并在BmN细胞中进行初步表达。方法利用MA104细胞繁殖人A组轮状病毒,RT-PCR扩增病毒结构蛋白vp2、vp6、vp7基因,连接至转移载体pFBDM和pUCDM中,同时引入含IE1启动子的绿色荧光蛋白基因利于检测感染和表达量,再分别通过Tn7及Cre-LoxP重组构建重组病毒。为方便检测基因的表达,在VP7的C-末端添加6-组氨酸(6-His)标签,可通过ELISA等方法快速检测目的基因表达。结果扩增获得了轮状病毒三个结构蛋白基因,构建了能高效组装轮状病毒样颗粒的重组表达载体,ELISA检测VP7得到了表达,在BmN细胞中观察到病毒样颗粒。结论成功构建杆状病毒多基因的表达系统,为生产多亚基蛋白复合物,研究大分子结构提供借鉴。

关 键 词：轮状病毒样颗粒  家蚕杆状病毒  多基因表达系统  BmN细胞  疫苗

分 类 号：R373]