文献类型：期刊文章

作　　者：张烨[1] 于在江[1] 辛丽[1] 陈永坤[1] 唐启慧[2] 陈禹保[3] 陈清轩[2] 舒跃龙[1]

机构地区：[1]中国疾病预防控制中心病毒病所国家流感中心,北京100052 [2]北京标凯科技有限公司,北京100094 [3]北京中亚国瑞生物经济研究所,北京102206

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：国家科技支撑计划(No.2006BAD06A15)资助~~

年　　份：2010

卷　　号：26

期　　号：8

起止页码：1068-1073

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：在成功克隆流感病毒H1N1全长HA（Hemagglulinin，HA）、NA（Neuramidinase，NA）基因并测序的基础上，将部分基因序列克隆到表达载体pMETA上，构建了重组表达质粒pMETA/HA（52～1557bp）、pMETA／NA（121～1263bp），电转化真核酵母菌pMAD16，甲醇诱导表达，利用Ni^2＋亲和层析柱对重组蛋白进行纯化，并用Western blotting和ELISA方法检测其抗原性。SDS-PAGE显示重组蛋白在酵母菌中可以高效表达，蛋白纯度占总蛋白的95％以上，ELISA和Western blotting实验证实，重组蛋白具有良好的抗原性。成功克隆和表达了流感病毒H1N1HA、NA基因序列，为流感病毒H1N1诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究提供了参考。

关 键 词：流感病毒H1N1  血凝素 神经氨酸酶 酵母表达

分 类 号：R378]