文献类型：期刊文章

作　　者：赵红燕[1] 冯尚国[1] 沈波[1] 王慧中[1]

机构地区：[1]杭州师范大学生物化学与分子生物学杭州市重点实验室,浙江杭州310036

出　　处：《中草药》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30670199;30770185;30870180);浙江省自然科学基金资助项目(X305692;X301406);浙江省科技计划资助项目(2008C12081);杭州市重点实验室项目(20080432T06);钱江人才计划资助项目

年　　份：2010

卷　　号：41

期　　号：8

起止页码：1353-1358

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、IPA、JST、RCCSE、RSC、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的建立金钗石斛Dendrobiumnobile相关序列扩增多态性(SRAP)反应体系,为金钗石斛分子生物学研究提供技术支持。方法运用L25(56)正交设计对影响金钗石斛SRAP反应的5个因素:模板DNA、Mg2+、dNTPs、Taq酶、引物在5个水平上进行优化试验,对PCR结果进行极差分析。结果金钗石斛SRAP反应最佳体系为:25μL PCR体系中含有20 ng模板DNA,2.0 mmol/L Mg2+,0.2 mmol/L dNTPs,1 UTaq酶,0.6μmol/L引物。各因素对SRAP反应的影响依次为:Taq酶>Mg2+>dNTPs>模板DNA>引物。结论所建立的金钗石斛SRAP反应体系具有标记位点清晰、多态性丰富、稳定性好等特点,可用于金钗石斛分子生物学的研究。

关 键 词：金钗石斛 SRAP 优化  正交设计

分 类 号：R286.1[中药学类]