文献类型：期刊文章

作　　者：王宇[1] 姚辉[2] 温丽[3] 孙茜[2] 李郁[2] 刘文超[1]

机构地区：[1]第四军医大学西京医院肿瘤中心/细胞生物学国家重点学科,陕西西安710032 [2]第四军医大学基础部细胞生物学教研室/细胞工程研究中心,陕西西安710032 [3]第四军医大学口腔医学院正畸科,陕西西安710032

出　　处：《现代肿瘤医学》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.30572100;30672391;30770823);全军医药卫生科研基金(No.06MA205);陕西省自然科学基金(No.2004C222)

年　　份：2010

卷　　号：18

期　　号：8

起止页码：1473-1476

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:构建含人全长CypA cDNA的真核表达质粒,建立高表达CypA蛋白的肝癌细胞系,为进一步研究CypA在肝癌中的功能和作用机制提供细胞模型。方法:将人全长CypA cDNA序列克隆后,连接至真核表达载体pcDNA3.1中,再将构建的真核表达载体转染至FHCC98肝癌细胞中,经G418加压筛选后获得稳定表达CypA的肝癌细胞株;免疫印迹法检测目的蛋白的表达情况;MTT法测定细胞的增殖速率。结果:真核表达载体pcDNA3.1-CypA经酶切、测序鉴定,结果正确;免疫印迹结果显示,稳定转染后细胞的CypA表达水平显著高于空载体转染和未转染的细胞;与对照相比,稳定高表达CypA的细胞增殖速度加快。结论:成功构建了含有人全长CypA cDNA序列的真核表达载体pcDNA3.1-CypA;建立了稳定高表达CypA的FHCC-98肝癌细胞系;CypA的高表达可以促进FHCC98细胞的增殖。

关 键 词：亲环素A 稳定转染 肝细胞肝癌 细胞增殖

分 类 号：R73-3] R735.7[临床医学类]