文献类型：期刊文章

作　　者：李伟[1] 张雪梅[2] 郑晓红[1] 段雯[1] 余瑜[1]

机构地区：[1]重庆医科大学药学院药物化学教研室,重庆市渝中区医学院路1号400016 [2]重庆医科大学社区医疗中心,重庆市渝中区医学院路1号400016

出　　处：《光谱实验室》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30772595)

年　　份：2010

卷　　号：27

期　　号：4

起止页码：1614-1620

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、RSC、核心刊

摘　　要：建立尺寸排阻色谱柱上尿素梯度复性全长人PPAR-γ重组蛋白的方法。利用尺寸排阻色谱柱上尿素梯度除去变性剂直接复性变性蛋白。添加尿素和精氨酸抑制聚集以提高复性产率,加入Zn2+促进变性蛋白形成正确折叠。复性后,重组蛋白的尺寸排阻色谱保留体积增大;紫外光谱最大吸收波长从234.0nm变为280.8nm;基质辅助激光解析-电离飞行时间质谱分析重组蛋白的完整性,测得分子量与理论值一致;放射配体受体结合饱和实验测得解离常数(Kd)为89±4nmol/L;复性产率为52.7%。结果表明本文所建立的方法能成功用于复性变性全长人PPAR-γ,获得可用于结构和功能研究的具有生物学活性的全长人PPAR-γ蛋白。

关 键 词：过氧化物酶体增殖物激活受体 复性 尺寸排阻色谱  紫外光谱 基质辅助激光解析-电离飞行时间质谱  

分 类 号：O657.63]