文献类型：期刊文章

作　　者：唐宁[1,2] 金洁[3] 邓云[2] 柯荣湖[2] 沈秋瑾[2] 樊少华[2] 覃文新[2]

机构地区：[1]复旦大学上海医学院,上海200032 [2]上海市肿瘤研究所,癌基因及相关基因国家重点实验室,上海200032 [3]江苏大学生命科学院,镇江212013

出　　处：《生理学报》

基　　金：supported by National Basic Research Development Program of China(No.2009CB521803);Shanghai International Science and Technology Cooperation Project Fund(No.08410700900)

年　　份：2010

卷　　号：62

期　　号：3

起止页码：196-202

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：人源性长寿保障基因2(Homo sapiens longevity assurance homologue2,LASS2)是本实验室克隆到的一个与酵母长寿保障基因LAG1高度同源的人类新基因。前期研究显示,LASS2可与V-ATPase质子泵的c亚基ATP6L结合,过表达LASS2可以抑制肝癌细胞SMMC-7721的生长。本研究旨在探讨LASS2对V-ATPase质子泵功能的调节是否参与LASS2对肝癌细胞生长的抑制作用。使用本室构建、保存的pCMV-HA2-LASS2质粒瞬时转染肝癌细胞(HCCLM3),而未转染质粒的HCCLM3细胞作为空白对照,运用CCK-8试剂盒检测细胞生长情况;采用BCECF-AM和BCECF氢离子敏感探针分别测定细胞内、外H+浓度;应用流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测线粒体和胞质内细胞色素c(cytochrome c,Cytc)、胞质中的无活性pro-caspase-3的表达情况。结果显示,外源性LASS2的过表达对HCCLM3细胞生长有抑制作用;过表达LASS2使HCCLM3细胞内H+浓度上升,细胞凋亡率提高,线粒体Cyt c释放增加,胞质中pro-caspase-3含量下降。以上结果提示提示LASS2可能通过调控V-ATPase质子泵的功能,提高细胞内H+浓度,从而激活细胞线粒体凋亡途径、抑制肝癌细胞的生长。

关 键 词：人源性长寿保障基因2  肝癌 细胞生长 凋亡  细胞色素C

分 类 号：R735.7]