文献类型：期刊文章

作　　者：郭虹[1] 陈观今[1] 周永安[1] 郑焕钦[1] 刘彦文[1]

机构地区：[1]中山医科大学寄生虫学研究所

出　　处：《中国人兽共患病杂志》

基　　金：中国博士点医学科研基金

年　　份：1999

卷　　号：15

期　　号：1

起止页码：3-5

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX1996、CSCD、CSCD2011_2012、核心刊

摘　　要：目的构建弓形虫ＺＳ２株ｐｃＤＮＡ３－ＲＯＰ１真核表达重组质粒，为进一步表达及ＤＮＡ免疫做准备。方法用ＰＣＲ技术从弓形虫ＺＳ２分离株的基因组ＤＮＡ中扩增编码棒状体蛋白１（ＲＯＰ１）的基因片段，重组入ｐＵＣ１８克隆载体。将ｐＵＣ１８－ＲＯＰ１中的ＲＯＰ１外源基因片段经酶切、连接等反应，亚克隆入ｐｃＤＮＡ３真核表达载体，再经含氨苄ＬＢ培养基筛选，酶切、ＰＣＲ鉴定。结果从ＺＳ２株基因组ＤＮＡ中扩增出特异的ＲＯＰ１基因片段，克隆成功ｐＵＣ１８－ＲＯＰ１；经亚克隆，筛选鉴定获得了ｐｃＤＮＡ－ＲＯＰ１重组质粒。结论构建成功弓形虫ｐＵＣ１８－ＲＯＰ１重组质粒，亚克隆成功ｐｃＤＮＡ－ＲＯＰ１重组质粒。

关 键 词：克隆 重组质粒 弓形体病 ROP1基因  DNA免疫

分 类 号：R531.803]