文献类型：期刊文章

作　　者：许希晨[1] 葛亚东[1,2] 王敖[1] 王程[1] 朱国萍[1,2]

机构地区：[1]安徽师范大学生命科学学院分子进化与生物多样性重点实验室,安徽芜湖241000 [2]安徽师范大学生命科学学院分子生物学及生物技术研究所,安徽芜湖241000

出　　处：《激光生物学报》

基　　金：国家自然科学基金项目(30500300;30870062);教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-06-0558);安徽省优秀青年科技基金项目(06043089);安徽省引进海外留学人才基金项目(2005Z032)

年　　份：2010

卷　　号：19

期　　号：3

起止页码：373-379

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：对枯草杆菌异柠檬酸脱氢酶(BsIDH)、大肠杆菌异柠檬酸脱氢酶(EcIDH)和大肠杆菌异柠檬酸脱氢酶的突变体酶(EmIDH)进行了纯化和酶学性质鉴定。BsIDH和EcIDH对辅酶NADP^+的特异性与NAD^+相比,分别是NAD^+的1 330倍和3 890倍。而EmIDH对NAD^+的特异性与NADP^+相比,是NADP^+的122倍。因此,BsIDH和EcIDH是NADP^+依赖性异柠檬酸脱氢酶,而EmIDH的辅酶特异性已转换为NAD^+依赖性。EcIDH、BsIDH和EmIDH对底物异柠檬酸的K_m值分别为67.4 μmol/L、60.6μmol/L和105.6μmol/L。BsIDH和EcIDH的最适反应pH分别为8.2和8.0,EmIDH的最适反应pH为7.0。BsIDH和EmIDH的最适反应温度是45℃,EcIDH的最适温度为43℃。三种IDH的活性依赖于不同的二价金属离子的存在,Mn^(2+)、Mg^(2+)存在时酶活性最强,Cu^(2+)、Ca^(2+)、Zn^(2+)和Ni^(2+)强烈抑制酶的活性。系统的酶学性质研究为深入认识IDH的催化与调节机制提供了更多依据。

关 键 词：枯草杆菌 大肠杆菌 异柠檬酸脱氢酶 突变体酶  辅酶特异性  酶学性质

分 类 号：Q786]