文献类型：期刊文章

作　　者：吴坤[1,2] 冯娟[1,2] 姚伦广[1] 楚素霞[1,3] 阚云超[1]

机构地区：[1]中英南阳洛桑昆虫生物学联合实验室河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室南阳师范学院生物科学与技术学院,南阳473061 [2]河南农业大学生命科学学院,郑州450002 [3]河南师范大学生命科学学院,新乡453007

出　　处：《中国生物工程杂志》

基　　金：国家自然科学基金(30700750);河南省省教育厅科技攻关项目(2008A180020)资助项目

年　　份：2010

卷　　号：30

期　　号：5

起止页码：96-102

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：构建家蚕Bombyxmori肌动蛋白(BmA3)启动子驱动的家蚕核型多角体病毒(BmNPV)多角体基因(ph)和OpNPV极早期启动子(IE1)驱动的zeocin抗性筛选基因转座供体载体,与鳞翅目辅助转座质粒pie2piggyBac共转染家蚕卵巢细胞BmN,经200μg/ml zeocin抗生素筛选一个月,成功获得持续表达BmNPV多角体蛋白的稳定细胞系BmN-A3ph。多角体缺陷型重组病毒BmBac-GF P感染拯救细胞系BmN-A3ph,细胞成功装配出病毒包涵体颗粒,其包装效率约为野生型病毒感染正常BmN细胞的8%。用拯救型包涵体病毒颗粒喂食家蚕幼虫进行复感染,结果表明稳定细胞系所包装的包涵体病毒与野生型病毒一样能够通过口服途径感染宿主,却并不在宿主体内形成包涵体,从而保证外源基因高效表达。拯救型包涵体病毒可望解决传统注射感染效率较低问题,通过喂食感染可促进杆状病毒介导的家蚕生物反应器产业化进程。

关 键 词：拯救细胞系  piggyBac转座  包涵体 家蚕生物反应器

分 类 号：Q789]