文献类型：期刊文章

作　　者：吕沁风[1,2] 郑伟[2] 罗鹏[2] 吴忠华[2] 李禾[2] 沈建根[1]

机构地区：[1]浙江大学医学院,浙江杭州310058 [2]浙江国际旅行卫生保健中心,浙江杭州310003

出　　处：《浙江大学学报（医学版）》

年　　份：2010

卷　　号：39

期　　号：3

起止页码：305-310

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:建立一种快速简便的嗜肺军团菌分子检测方法。方法:运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),设计一套引物特异性识别嗜肺军团菌毒力基因——mip基因的6个特殊区域,在恒温条件下,对8株嗜肺军团菌和5株其它细菌进行检测,并与普通PCR方法进行比对,验证该方法的特异性和灵敏度。结果:所有嗜肺军团菌扩增产物均产生肉眼可见的白色沉淀,而其它不同菌株均不产生沉淀;加入荧光染料smart green后,嗜肺军团菌扩增产物均产生强绿色荧光,其它菌株呈弱荧光。与普通PCR(检出限约为57.6 pg,)比,LAMP扩增反应的灵敏度大100倍左右,基因组DNA检出限为576 fg,阳性水样检出限为8 cfu/ml。结论:LAMP技术可在简易的实验环境中快速、特异、灵敏地检测嗜肺军团菌。

关 键 词：军团病杆菌,嗜肺  军团杆菌病/诊断  基因扩增 聚合酶链反应/方法  增强子元件(遗传学)  

分 类 号：R378.99]