文献类型：期刊文章

作　　者：潘少辉[1] 胡玥[1] 张姗姗[1] 王静[1] 李飞飞[1] 高志敏[1] 杨春荣[1] 华进联[1]

机构地区：[1]西北农林科技大学动物医学院,陕西省干细胞工程技术研究中心,陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西杨凌712100

出　　处：《西北农林科技大学学报（自然科学版）》

基　　金：国家自然科学基金项目(30972097);教育部重点科研项目(109148);中国博士后科学基金项目(200801438)

年　　份：2010

卷　　号：38

期　　号：6

起止页码：23-30

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：【目的】从成年昆明小鼠睾丸组织中分离具有多能性的雄性生殖干细胞(Male germline stem cells,mGSCs)。【方法】采用机械法和2步酶消化法分离出成年昆明小鼠的精原细胞,经差速贴壁后,培养在小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)饲养层上,2周后得到类胚胎干细胞(ESCs)样mGSCs。对得到的mGSCs进行碱性磷酸酶(AP)染色、免疫荧光染色、RT-PCR、体内分化等检测。【结果】mGSCs具有类似ESCs的形态和多能性,AP染色呈阳性,免疫荧光Oct4、Vasa染色呈阳性,RT-PCR检测其表达Oct4、Nanog、Sox2等多能性基因和Vasa、C-kit等生殖细胞的标记基因,在免疫缺陷鼠体内能形成畸胎瘤,组织学检测其可形成包括3个胚层在内的多种类型细胞。【结论】从成年昆明小鼠睾丸分离的精原细胞,在体外培养去分化形成了具有类ESCs生物学特性的mGSCs,mGSCs既具有多能性,也具有生殖细胞的基本生物学特性。

关 键 词：成年昆明小鼠  精原细胞 雄性生殖干细胞  多能性

分 类 号：Q813.11[生物工程类] Q492.4