文献类型：期刊文章

作　　者：毛雄英[1] 王卫华[2] 王德扬[3] 陈辉[1]

机构地区：[1]宁波大学医学院宁波市医学分子诊断中心,浙江宁波315020 [2]宁波大学医学院附属医院,浙江宁波315020 [3]浙江省宁波市医学会,浙江宁波315000

出　　处：《中国卫生检验杂志》

年　　份：2010

卷　　号：20

期　　号：5

起止页码：1076-1078

语　　种：中文

收录情况：CAS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:研究模板纯化与否对血浆HBV DNA实时荧光定量PCR检测线性范围、重复性、灵敏度的影响。方法:采用国产离心柱法DNA纯化试剂盒及实时定量PCR试剂盒提供的直接煮沸裂解法处理107～10110倍浓度梯度稀释的血浆样本和标准品及乙肝窗口期患者的血清标本,用国产HBV PCR荧光定量扩增试剂盒检测,比较其检测结果线性范围、重复性、灵敏度及乙肝窗口期患者HBV DNA阳性检出率。结果:离心柱纯化组和煮沸裂解组的检测线性范围分别为107IU/ml～101IU/ml和107IU/ml～103IU/ml;灵敏度分别为24 IU/ml～48 IU/ml和1200 IU/ml～2400 IU/ml;104IU/ml、103IU/ml、102IU/ml样品的批内变异系数(CV)离心柱纯化组为2.5%、2.3%、1.8%,煮沸裂解组为1.9%、1.6%、12%,批间变异系数(CV)离心柱纯化组为2.3%、2.9%、5.4%,煮沸裂解组为1.7%、4.5%、7.7%;离心柱纯化组和煮沸裂解组的窗口期患者血清标本阳性检出率分别为83.9%和3.6%。结论:HBV血清样品经离心柱纯化可以极大地改善乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测结果。

关 键 词：乙型肝炎病毒 病毒DNA纯化  实时荧光定量PCR

分 类 号：R446.5]