文献类型：期刊文章

作　　者：陈瑞爱[1,2] 邵定勇[2] 韩静芳[2]

机构地区：[1]中国农业大学生物学院,北京100083 [2]广东大华农动物保健品股份有限公司,广东新兴527400

出　　处：《中国兽医学报》

基　　金：广东省高新技术产业基金资助项目(2006B16102019)

年　　份：2010

卷　　号：30

期　　号：5

起止页码：577-582

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：为了构建伪狂犬病毒容A株(PRV-Ra)TK基因缺失重组病毒,本研究利用PCR从PRV-Ra株基因组分别扩增TK基因两侧的序列LTK和RTK,将LTK和RTK克隆到pUC19载体,构建转移质粒pUC19-TK/HEK。进一步将增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)表达盒克隆到pUC19-TK/HEK质粒中,构建转移质粒pUC19-TK/EGFP。用pUC19-TK/EGFP与PRV-Ra株基因组共转染BHK21细胞,通过噬斑纯化获得重组病毒PRV/TK-/EGFP;用pUC19-TK/HEK与PRV/TK-/EGFP病毒基因组共转染BHK21细胞,噬斑纯化获得不含EGFP基因的重组病毒PRV/TK-。该重组病毒在体外传30代后仍其有良好的遗传稳定性;PRV/TK-体外增殖速度、对家兔的毒力以及对仔猪的安全性和抗体反应性研究表明,重组毒株与原始株(PRV-Ra)在BHK21上具有相似的增殖规律;PRV/TK-对家兔的毒力比PRV-Ra下降了10000倍;以105.0TCID50PRV/TK-免疫小猪后4周,体内产生的平均中和抗体水平达101.9,略高于对照疫苗产生的抗体水平(101.8)。本试验为PRV基因功能的研究及PRV基因缺失苗的研发提供了技术平台。

关 键 词：伪狂犬病毒容A株  TK缺失  生物学特性

分 类 号：S852.65]