文献类型：期刊文章

作　　者：何琳[1] 徐海圣[1] 王美珍[2] 戎华南[2]

机构地区：[1]浙江大学动物科学学院,浙江杭州310029 [2]慈溪市水产技术推广中心,浙江慈溪315300

出　　处：《水产学报》

基　　金：浙江省科技计划项目(2005C33053);宁波市农业科技攻关项目(2008C10041);宁波市海洋与渔业专项资金项目(7-3)

年　　份：2010

卷　　号：34

期　　号：4

起止页码：598-603

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28基因保守序列,利用Primer Explorerv 4.0软件设计了4条引物,建立了白斑综合征病毒环介导等温扩增快速检测方法,对反应温度和反应时间等参数进行了优化,同时将建立的LAMP检测方法与巢式PCR进行了比较分析。结果表明,LAMP最适反应在64℃恒温条件60min内完成,凝胶电泳呈现梯型条带;反应体系中添加SYBR Green I荧光染料后,绿色的阳性结果明显区别于橙色阴性结果。LAMP方法的最低检出限为100拷贝/μL,灵敏度较巢式PCR高100倍,而且LAMP方法在1h内即可完成检测,操作简单,无需复杂仪器,肉眼可直接观察检测结果。用建立的LAMP方法对临床发病南美白对虾样品进行了检测,结果表明,LAMP方法适合对虾白斑综合征病毒的现场快速检测。

关 键 词：对虾 白斑综合征病毒 环介导等温扩增 快速检测  

分 类 号：S945.4]